发布日期：2024-03-29 21:32:16
CelCode®高通量单细胞测序系统是由百奥益康凭借其卓越的科研实力独立研发的单细胞油包水技术平台。该系统融合了微流控技术、油滴包裹技术和Barcode 标记技术，实现了自动化、一键式的单细胞高通量分离、捕获 及标记操作 。 配合高通量单细胞试剂盒使用，该系统能够 在极短的时间内形成油包水乳浊液。其采用1×4方式的芯片组合设计，可根据 样本数量需求进行灵活调整，使其研究更加高效且节约。通过该系统对单细胞进行建库构建和测序后，可一次性获得大量细胞的基因表达信息。CelCode®高通量单细胞测序系统的出现，将会大大提高高通量单细胞测序实验的效率和质量，还将为生物医学研究领域带来突破性的成果。
百奥益康CelCode®高通量单细胞测序系统
产品优势
4 个独立控制通道可同时运行4个独立样本，单样本捕获细胞数500-10,000，更高效捕获稀有类型细胞
相较于某进口单细胞系统，基因检出能力进一步提高
重复实验中，捕获细胞数、基因中位数、细胞分群可重复性高，稳定可靠
多胞率<0.7 % (1,000 cells)，细胞 捕获效率高达65%
运行时间短，6 min 极速完成油包水、核酸捕获、细胞标记等实验过程
配备独立1×4的芯片，1个样本也可上机，拒绝凑样和浪费芯片
一键式操作，便捷零失误，智能控制实验条件、过程，实验完成及智能报错提示
完全自主产权，安全可靠，且大幅度降低单细胞研究成本
原理流程
CelCode®单细胞胶珠为百奥益康完全自主设计研发，胶珠上种有特定的引物，由R1、CellBarcode、UMI、Poly d(T) 四部分组成。
I R1：测序引物，用于后续高通量测序；
II CellBarcode：细胞标签，每个胶珠仅对应一个特定的Cell Barcode；
III UMI：mRNA分子标签，标记 mRNA片段 ，从而消除PCR偏差；
IV Poly d(T)：与mRNA 3'端poly(A)结合，用于后续的反转录过程。
百奥益康CelCode®单细胞胶珠结构
CelCode® 系统基于微流控技术分选单个细胞， 将带有Barcode和引物的凝胶珠以及单个细胞包裹在油滴中，逆转录后产生带Barcode的cDNA，油滴破解后，对cDNA进行建库和高通量测序，即可一次性获得大量单细胞的基因表达数据，从而实现细胞亚群分类与细胞群体间标记物筛选。
百奥益康CelCode®单细胞测序原理
文库构建流程
利用CelCode® 系统形成包含有单个细胞的油包水结构后，细胞裂解，凝胶珠溶解释放大量引物序列，Poly d(T反转录引物通过poly(A) 捕获mRNA，然后被反转录为带有 CellBarcode和UMI信息的cDNA一链，再以SMART方 式完成二链合成。油滴破碎后，纯化cDNA并进行PCR扩增。接下来，酶切片段化并筛选最适片段，通过末端 修复、加A、接头连接Read2测序引物，再以PCR方式构建含有P5和P7接头的cDNA文库。
百奥益康CelCode®单细胞文库构建流程
数据展示
基因检出率高 ：
利用百奥益康CelCode®高通量单细胞测序系统和某进口单细胞测序系统分别检测一分为二的同一份小鼠脑单细胞悬液样本，进行两次独立单细胞测序测试，结果显示两次测试数据细胞聚类分群一 致，基因中位数分别为2,593和2,399，说明该系统基因检出效率高，性能优秀。
数据产出稳定性强：
利用百奥益康CelCode®高通量单细胞测序系统检测人PBMC 样本 ， 将同一份人PBMC样本分为两份，进行两次独立单细胞测序测试，结果显示两次测试数据细胞聚类分群一致，基因中位数分别为1,847和1,891，说明该系统稳定强，可重复性好。
应用领域
百奥益康单细胞测序服务流程
百奥益康可提供完整的单细胞测序服务流程：组织样本获取→组织解离制备单细胞悬液→细胞分离与标记→细胞裂解与 核酸捕获→mRNA的反转录与扩增→建库&测序→生信分析→生成可视化报告。
高通量单细胞测序服务流程